一、宁夏集约化养猪场猪传染性萎缩性鼻炎的防治研究（论文文献综述）
王菲[1]（2021）在《一例猪传染性萎缩性鼻炎的诊疗措施分析》文中研究指明传染性萎缩性鼻炎是养猪生产中较为常见的传染性疾病,临床上主要以鼻炎及周边组织萎缩为主,可导致仔猪出现较为严重的死亡,或者导致病猪发育迟缓,降低饲料利用率,给养猪场造成的经济损失很大。本文根据一例猪传染性萎缩性鼻炎的发病情况进行分析阐述,力图帮助广大养殖户降低本病的发生几率。
吴国志[2]（2020）在《猪传染性萎缩性鼻炎的防治措施》文中研究说明我国养殖业正处于快速发展的时期,不断扩大的养殖规模也带来了一些问题,包括猪病的种类和数量逐渐增多,其中猪传染性萎缩性鼻炎是一种对养猪业危害严重的疾病。该病主要危害2～5个月的仔猪,导致猪只患病的是多杀性巴氏杆菌和支气管败血氏杆菌,致病菌能够通过猪只的呼吸道令其感染。本文主要论述了猪传染性萎缩性鼻炎的临床症状、流行特点以及防治措施。
焦秋林[3]（2020）在《山东省规模猪场支原体肺炎与传染性萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控技术研究》文中指出猪支原体性肺炎（mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyo pneumoniae,Mhp）引起的一种慢性间质性肺炎,又称猪气喘病。猪传染性萎缩性鼻炎（swine infectious atrophic rhinitis,AR）是由支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchisepfica,Bb）和多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）感染引起的一种慢性呼吸道传染病,两病均为难以治愈的细菌性呼吸系统疾病,在我国猪场严重流行,对养猪业造成重大经济损失。经调查了解山东省大多数规模猪场仅14日龄进行了一次MPS灭活疫苗免疫,AR未免疫。为了解当前两病在山东省规模化猪场的流行状况,评价疫苗免疫防控效果,为两病免疫程序调整优化及综合防控提供理论依据,20182019年对山东部分地区规模化猪场采集各阶段猪群喉头黏液拭子和鼻拭子,检测MPS、AR的病原感染情况;抽检部分屠宰生猪的肺脏进行眼观及镜检病变评分;抽检部分猪场病死猪的鼻腔病变,评估AR感染状态;对Mhp进行分离培养及药敏试验,确定Mhp流行菌株的敏感药物。2019年选择试验猪场分别对MPS、AR的免疫程序调整优化,对试验场两病的流行情况进行上述调查并与2018年调查试验猪场的情况进行比对。结果显示,20182019年分阶段采集的不同日龄的猪喉头黏液拭子,qPCR检测发现,从保育转育肥猪群后Mhp感染率升高幅度较大,25月份Mhp感染风险最高。以此为依据2019年对临沂某试验猪场的MPS免疫程序进行调整优化,仔猪7日龄活苗喷鼻,21日龄灭活苗注射;后备母猪前期免疫参照仔猪免疫程序,配种前灭活苗肌肉注射免疫一次;生产母猪在分娩前3周5周灭活苗肌肉注射。检测结果显示各阶段猪群Mhp抗体水平均维持较高水平,整体感染率下降,与调整前相比感染率平均降低72.23%,化解了保育猪群转育肥圈后的感染风险。检测试验场各阶段Mhp疫苗免疫猪群的血清中CSFV、PRRSV、PRV gE、PCV2的抗体,结果发现,与试验猪场免疫程序调整前相比各阶段猪群的平均抗体水平差异不显着,说明MPS免疫未影响病毒病的疫苗免疫效果。2018年抽查试验猪场屠宰猪的肺脏实变较为严重,以尖叶、心叶实变居多,肺脏实变检出率高达87.27%（48/55）;出血、淤血肺脏占67.27%（37/55）;气肿病变肺脏占12.73%（7/55）。2019年抽查试验猪场MPS免疫程序后屠宰猪的肺脏实变检出率为12.70%（8/63）,主要表现尖叶、心叶小面积实变,呈轻度间质性肺炎病变。药敏试验证明近两年流行的Mhp菌株对环丙沙星已产生了耐药性;对泰乐菌素、泰妙菌素、替米考星高敏,对四环素、林可霉素中度敏感。20182019年对山东莱芜、淄博、济宁、临沂、潍坊、德州的部分猪场进行AR流行病学调查。大部分猪场未进行AR疫苗免疫,通过剖检猪场病死猪并采集鼻腔图像进行分析,发现病死猪存在较高比例的AR感染病变,病变等级主要为1级,约占5.52%（28/507）。济宁地区猪场临床病例AR感染比例高达11.83%（11/93）。2018年对山东济宁、临沂、莱芜试验猪场猪鼻腔拭子PCR检测,结果发现2周龄仔猪感染比例较高,其中莱芜部分猪场2周龄仔猪的感染率高达40%（12/30）。2019年对三个地区试验猪场实施1周龄仔猪Bb+Pm二联灭活苗喷鼻免疫1次;母猪产前4周肌肉注射二联苗1次后,三个试验猪场2周龄仔猪AR感染率平均减少23%;莱芜免疫效果较好,2、3、4周龄仔猪阳性率分别降低26.67%、28.57%和9.33%。综上所述,猪场执行MPS免疫程序:仔猪于7日龄活苗喷鼻,21日龄灭活苗肌肉注射;后备母猪配种前灭活苗肌肉注射;生产母猪在分娩前3周5周灭活苗肌肉注射,公猪每年2次普免。MPS药物预防程序:猪群转入育肥圈后泰乐菌素、替米考星按治疗剂量预防2个疗程。AR免疫程序:仔猪7日龄Bb+Pm二联灭活油喷鼻;母猪产仔前4周二联苗肌肉注射。可显着降低MPS、AR感染发病率及肺脏的病变程度。
张丙周[4]（2020）在《副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究》文中提出猪细菌性疾病是一类由多种细菌性病原引起的疾病,其病原具有种类众多、血清型多、毒力因子复杂、传播能力强、耐药问题突出以及多种病原混合感染等特点,严重危害着我国猪群的健康。病原感染具有明显的时空分布,开展病原学调查有助于制定准确防的控策略。近些年,由于抗生素滥用导致的耐药问题愈发严重,细菌病防控也变得越来越困难,逐渐成为限制我国养殖业发展的关键因素,建立在敏感药物筛选基础上的合理用药可有效防控疾病,且提升猪产品的食用安全性。副猪嗜血杆菌是临床上危害猪群健康最严重的细菌性病原之一,能够引起猪只多发性浆膜炎、脑膜炎、支气管肺炎和关节炎等临床疾病,其致病因子众多,致病机制复杂。因此,副猪嗜血杆菌详细的致病机制仍然有待深入研究。群体感应系统是一种调控细菌自身功能与细菌之间信号交流的重要功能系统,对细菌生理特性、生物膜形成、细菌耐药性和毒力等特性的调节发挥着重要的作用,但并未见其在副猪嗜血杆菌中的报道。因此,本试验开展了群体感应系统与副猪嗜血杆菌致病机制的研究,希望为副猪嗜血杆菌病防控提供新思路。本研究首先调查了我国猪场常见细菌性病原的流行情况,并分析了其流行规律和耐药现状;然后以副猪嗜血杆菌为研究对象,阐述了群体感应系统与副猪嗜血杆菌生物学功能、生物膜形成和毒力等特性的相关性;进一步利用RNA-Seq技术研究了群体感应系统导致副猪嗜血杆菌特性变化的可能机制;最后发现了群体感应系统调节副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制和群体感应系统AI-2分子的受体蛋白Rbs B1。主要研究结果如下:1.猪场细菌性病原的流行特征及耐药性研究为了给猪场常见细菌病提供有效的防控指导,试验调查分析了我国猪场常见细菌性病原及其流行规律和耐药机制。2013-2017年,从全国16个不同省份的9661个猪场收集了44,175份临床样品。通过细菌分离鉴定,可知存在于我国猪场的主要细菌性病原有猪链球菌（38.0%）、副猪嗜血杆菌（21.9%）、多杀性巴氏杆菌（7.7%）、致病性大肠杆菌（14.4%）、胸膜肺炎放线杆菌（0.7%）、支气管败血波氏杆菌（3.4%）、沙门氏菌（5.1%）和红斑丹毒丝菌（2.0%）。其中猪链球菌（15.3%-18.6%）、致病性大肠杆菌（4.3%-9.9%）、胸膜肺炎放线杆菌（0.1%-0.5%）和沙门氏菌（1.6%-3.7%）的分离率呈现逐年增高的趋势,而副猪嗜血杆菌（11.6%-7.3%）和红斑丹毒丝菌（1.6%-0.6%）的分离率则出现了一定的下降,但是猪链球菌和副猪嗜血杆菌仍然是我国猪场分离率最高的两种细菌性病原。血清型分型结果显示,猪链球菌的最主要血清型仍然为血清2型,但血清2型菌株的分离率自2013年至2017年减少了约20%;副猪嗜血杆菌的流行优势血清型则由血清4型变为血清5型。季节性流行特征结果显示猪链球菌和副猪嗜血杆菌在炎热季节分离率较高,而多杀性巴氏杆菌则在2-4月份及10月份分离率较高。细菌耐药性试验结果显示,猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌对常见的8种类型（氨基糖苷类、大环内酯类、林可霉素类、四环素类、多粘菌素,磺胺类,β-内酰胺类和喹诺酮类抗生素）抗生素均表现出了较高的耐药率,而且多数细菌耐药率呈现出了逐年增高的现象。2.副猪嗜血杆菌Lux S/AI-2群体感应系统的功能研究通过分析不同菌株的基因组,发现群体感应系统广泛存在于多数细菌之中。为了探索群体感应系统对副猪嗜血杆菌的调控作用,构建了副猪嗜血杆菌的lux S基因缺失株（Δlux S）和互补菌株（C-lux S）,并利用亲本菌株和这两株重组菌株比较分析了群体感应系统对副猪嗜血杆菌在生长特性、生物膜形成和毒力的影响。结果发现,副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失后,其抵抗热应激和氧化应激的能力分别减弱了23.0%和25.7%,不同温度下细菌自身凝集能力和凝集红细胞的能力极显着减弱,粘附PK-15细胞的能力下降了约117倍,对小鼠的致病力下降约10倍,在小鼠不同组织的定植能力也均显着减弱,但是细菌抵抗渗透压应激的能力增强了23.7%,生物膜形成能力也显着增强。因此,群体感应系统广泛参与了副猪嗜血杆菌多种生理功能的调节。3.副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失株转录组学研究在副猪嗜血杆菌生长的稳定期前期收集了HPS2、Δlux S和C-lux S菌株,提取RNA后,去除宿主DNA。经RNA-Seq测序,获得了HPS2、Δlux S和C-lux S菌株转录样本的大量Reads。再通过数据过滤、序列比对和转录差异基因的富集等分析发现,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株出现了232个上调表达基因和212个下调表达基因,主要参与了碳代谢、RNA降解、三羧酸循环（TCA）等生物过程和转运、多种蛋白水解酶活性、离子跨膜运输、跨膜信号接收和信号受体活性等生物功能。同时,转录组学结果显示群体感应系统参与了副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制以及发现了参与群体感应系统功能调节的rbs B1基因。4.群体感应系统调控副猪嗜血杆菌抵抗热应激的研究HPS2、Δlux S和C-lux S菌株的转录组学结果显示,参与HPS热应激调节的多种基因均出现了转录水平的差异表达。本试验利用定量检测的方法,验证了这些基因的转录水平。结果发现,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株的rse A基因出现了显着的转录上调,rpo E,rse B,deg S,clp P和htr A基因出现了显着的转录下调,初步验证了副猪嗜血杆菌利用群体感应系统调控htr A基因的转录水平,进而调控其抵抗热应激的分子机制。为了进一步验证rse A和rpo E基因在调控副猪嗜血杆菌热应激中的作用,构建了副猪嗜血杆菌Δrse A和Δrpo E基因缺失株,证明了在副猪嗜血杆菌调控热应激中的rse A和rpo E基因分别发挥了负向调控作用和正向调控作用。5.受体蛋白Rbs B1在副猪嗜血杆菌群体感应系统中的作用HPS2、Δlux S和C-lux S菌株的转录组结果也显示,与HPS2菌株相比,Δlux S菌株的rbs B1基因出现了显着的表达下调。通过同源序列分析发现,副猪嗜血杆菌的rbs B1基因与具有群体感应系统的放线共生放线杆菌（IDH781菌株）以及流感嗜血杆菌（86-028NP菌株）rbs B1基因序列同源性分别高达72.4%和73.3%。因此,我们猜测rbs B1基因在副猪嗜血杆菌中可能发挥着与放线共生放线杆菌和流感嗜血杆菌的rbs B1基因类似的功能。试验利用构建的副猪嗜血杆菌rbs B1基因缺失株Δrbs B1和原核表达蛋白Rbs B1,证明了Rbs B1蛋白为副猪嗜血杆菌群体感应系统中AI-2分子的受体蛋白。试验结果显示,AI-2分子的浓度在Δrbs B1菌中的降低速度显着低于HPS2亲本菌株,而且AI-2分子的吸收与转运与Rbs B1蛋白的含量之间存在剂量依赖关系。该发现进一步完善了副猪嗜血杆菌群体感应系统的调控通路。综上所述,本文发现了2013-2017年我国部分猪场中常见细菌性病原的感染特点、耐药现状,为细菌病防控提供了参考;发现副猪嗜血杆菌存在群体感应系统,且该系统与副猪嗜血杆菌自身多种重要特性的改变密切相关;阐明了副猪嗜血杆菌抵抗热应激的可能分子机制以及发现了群体感应系统的受体蛋白,该研究为群体感应系统的深入研究奠定了基础。
李连平[5]（2018）在《猪传染性萎缩性鼻炎防治》文中认为猪传染性萎缩性鼻炎在世界各国广泛流传,是一种在临床上极为常见的慢性呼吸道传染病。猪传染萎缩性鼻炎主要是由支气管败血波士杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌引起的。其特征主要为患病猪生长迟缓,鼻炎、鼻甲骨萎缩、鼻中隔扭曲等。本文通过对猪传染性萎缩性鼻炎症状的探讨,提出防治措施。
叶真伟[6]（2018）在《一种猪萎缩性鼻炎疫苗在猪场的安全性评价及其应用效果的研究》文中进行了进一步梳理猪萎缩性鼻炎（AR）为猪呼吸道慢性传染病,分为进行性和非进行两种类型,主要病原为支气管败血性波氏杆菌和产毒多杀性巴氏杆菌,AR是公认的严重危害集约化养猪场生产和发展的重要传染性疾病之一,对国内外养猪业造成严重的影响。目前,主要通过免疫猪萎缩性鼻炎疫苗,加强饲养管理来防止该疾病的感染和传播。实验目的:为了评估市场上某猪萎缩性鼻炎灭活疫苗在湖南某规模猪场使用的安全性和实际应用效果的研究。实验方法:2017年4月对某屠宰场现场调查,评估某规模化猪场猪群猪萎缩性鼻炎感染情况,并对其采取该疫苗的免疫措施,对该灭活疫苗的安全性做评价及对免疫该疫苗所带来的经济效益做分析。一、通过对比空白组和免疫组的发病情况以及屠宰现场调查,对某规模化猪场的AR发病情况做有效评估;二、研究该猪萎缩性鼻炎疫苗的安全性,随机选取日龄和生长情况相近的怀孕母猪50头,分成两组,免疫组在产前89周对其进行第一次免疫,空白组不做处理,分别测量空白组和免疫组免疫前的体温以及免疫后6h、24h、48h的体温,同时记录免疫母猪局部和全身性的反应情况;于产前45周进行第二次免疫,处理方法和测量指标同上,同时记录免疫后母猪繁殖性能指标。三、进一步研究该疫苗免疫怀孕母猪后对其所产后代仔猪从保育到育肥阶段所带来的经济效益。从免疫组母猪的后代随机挑选仔猪299头、295头分别作为保育仔猪免疫组Ⅰ、Ⅱ,随机挑选未免疫母猪的后代仔猪276头、275头分别作为实验空白组Ⅰ、Ⅱ。分析该疫苗对保育猪群的经济效益的影响;之后做进一步追踪实验,从免疫母猪的后代保育猪中随机选576头作为育肥免疫组Ⅰ,从未免疫母猪的后代保育猪中随机选539头作为育肥实验空白组Ⅰ,分别统计每组各阶段猪群的成活率、日增重、出栏时间、料肉比、生长性能等。实验结果:1、通过统计0h、6h、24h、48h各时间点免疫组和空白组怀孕母猪的体温变化情况,母猪体温均处于正常范围;免疫后母猪采食量也正常、无副反应,提示该疫苗安全可靠,且疫苗对怀孕母猪造成的应激较小以及对母猪的繁殖指标的影响不显着。2、该萎缩性鼻炎疫苗不但具有良好的安全性,还有较理想的临床免疫效果,通过随机调查该规模化猪场空白组6个样本的肥猪,统计分析得出猪萎缩性鼻炎的中度感染和重度感染各占50%;在使用该疫苗免疫后在屠宰现场免疫组9头肥猪的调查中发现该场肥猪有77.78%（04分）的猪鼻甲骨为轻度病变、22.22%（58分）的猪鼻甲骨为中度病变,确定该疫苗使用后对猪群萎鼻发病情况的改善起到了很大的作用,能有效地提高猪群的健康度。此外,对怀孕母猪免疫后,其后代仔猪从产房到保育最后到育肥阶段均有效地提高了日增重,成活率等,带来更好的经济效益,为养猪业降低经济损失,而且对后代仔猪其他疫苗的免疫干扰作用不明显,也不影响正常的疫苗免疫。结论:该萎缩性鼻炎灭活苗是安全、有效且能有效提高生产效益,降低生猪养殖的经济损失。
王美芬[7]（2018）在《猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素（PMT）单克隆抗体的制备》文中研究表明在当今世界范围内,猪呼吸道疾病综合征（PRDC）给现代集约化养猪业造成了严重的经济损失。其中由细菌继发感染导致的发病占据相当的比例,因此对发病猪群进行呼吸道细菌性病原的分离鉴定及药敏试验对猪呼吸道疾病的诊断及临床用药具有重要的参考意义,同时亦可为后续的研究提供实验材料和研究依据。当前对我国猪群危害严重的细菌病是猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病。猪链球菌是一种重要的人畜共患病原,可以引起猪和人类的多种疾病。目前,根据荚膜抗原特异性,猪链球菌可以分为33个血清型,研究表明其血清型与致病性具有一定的相关性。副猪嗜血杆菌病是当前我国猪群的头号细菌继发感染性疾病,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。多杀性巴氏杆菌在猪群的感染也非常普遍,由产毒素性多杀性巴氏杆菌（toxigenic Pasteurella multocida,T+Pm）感染导致的猪萎缩性鼻炎（Swine atrophic rhinitis,AR）是一种世界性的猪病。由T+Pm分泌产生的多杀性巴氏杆菌毒素（Pasteurella multocida toxin,PMT）是萎缩性鼻炎的主要致病因子,单独接种PMT可以在试验猪体内复制AR的所有主要症状。该毒素是一种蛋白质,分子量约为146kDa,针对PMT蛋白及其抗体的检测是目前诊断AR的重要手段。因此,通过制备针对PMT的单克隆抗体建立检测PMT的免疫学方法具有重要意义。详细研究如下:1.猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离和猪链球菌血清型鉴定对江苏、浙江、山东、广西、山东等省送检的84份肺脏、脾脏等病料组织进行了细菌分离和培养,通过对菌落进行形态学、染色特性鉴定,将疑似菌株用种特异性引物进行PCR鉴定或用16S rRNA基因通用引物PCR扩增后进行测序鉴定。一共分离到如下菌株:35株猪链球菌、13株副猪嗜血杆菌、10株多杀性巴氏杆菌、7株支气管败血波氏杆菌、3株传染性胸膜肺炎放线杆菌。其中猪链球菌是最主要的病原,通过多重PCR技术对本实验分离到的35株猪链球菌进行分型,血清型分布如下:除了 2株不能分型外,其余分别为2型、9型、16型、8型、3型、29型、25型、31型、4型、18型,所对应的细菌数量分别为5株、3株、1株、2株、1株、1株、1株、1株、1株、1株,其中2型和9型为优势血清型。2.猪呼吸道疾病综合征细菌的耐药性分析采用Kirby-Bauer（K-B）纸片扩散法,对35株猪链球菌、13株副猪嗜血杆菌和10株多杀性巴氏杆菌进行耐药性分析,结果显示所分离到的猪链球菌对头孢噻肟和青霉素较敏感,敏感率分别为97%和94.3%,其次为阿莫西林,敏感率为86%,所分离到的猪链球菌对林可霉素、卡那霉素和四环素表现出较高的耐药率,耐药率分别为86%、77.2%和78%,对甲氧苄啶的耐药率为62.8%。多重耐药性结果显示只有1株SS对以上11种抗生素全部敏感,其中耐4种和3种抗生素的细菌最多,分别为11株和10株,耐7种、6种、5种、2种、1种抗生素的SS分别为1株、1株、6株、3株、2株。HPS对氟苯尼考和恩诺沙星的敏感性最强,敏感率均为100%,其次为阿莫西林和多西环素,敏感率均为92.3%。HPS耐5种抗生素的有3株,耐4种抗生素的有1株,耐3种抗生素的有2株。10株巴氏杆菌绝大多数对头孢噻肟、青霉素G和阿莫西林较敏感,而对林可霉素、磺胺异恶唑不敏感,同时获得一株具有磺胺药物耐药性的菌株LH4。对LH4进行质粒提取,获得一个同时携带链霉素和磺胺抗性基因strA和sulⅡ的质粒 pLH4。3.多杀性巴氏杆菌毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定为了建立检测产毒素型巴氏杆菌的免疫学检测方法,以原核表达并纯化后的重组PMT蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术,通过数次亚克隆以及间接ELISA方法的筛选过程,制备并鉴定出3株能够稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E3、5G6和2H4。Western blot结果证明这3株单克隆抗体均能够与重组PMT和T+Pm发生特异性反应。单抗3E3、5G6和2H4的细胞上清效价分别为1:3200、1:3200和1:6400。传代培养至20代时,检测分泌的抗体效价基本一致,说明三株杂交瘤细胞株能够连续传代并且稳定分泌抗体。单抗亚类鉴定结果表明单抗5G6和3E3属于IgG1亚类,2H4属于IgG2a亚类,3株单抗轻链均为κ型。相加实验证明3株单抗的抗原识别位点相同。
张洁[8]（2013）在《猪萎缩性鼻炎基因重组疫苗的比较研究》文中提出猪传染性萎缩性鼻炎（Swine infectious atrophic rhinitis, AR）是一种猪的主要呼吸道传染病,主要由D型产毒素多杀性巴氏杆菌（Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm）和支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica, Bb）单独或共同感染引起,可造成猪的慢性鼻炎、鼻甲骨萎缩甚至消失,降低猪只生产性能,严重者甚至死亡,给养殖业造成了严重的经济损失。Bb的丝状血凝素FHA和百日咳杆菌粘附素PRN被认为是该菌重要的粘附因子和抗原成分；而T+Pm toxA基因编码的皮肤坏死毒素（DNT）是其主要致病毒力因子,研究表明ToxA基因C端和N端编码的氨基酸结构分别是DNT的催化位点和粘附位点,两者都具有良好的免疫原性。本实验室分别以减毒沙门氏菌和减毒波氏杆菌为载体,已构建了表达支气管败血波氏杆菌FHA和PRN融合基因的重组沙门氏菌C501（PYA-F1P2）.表达多杀性巴氏杆菌toxA基因的重组沙门氏菌C501（PYA-toxA）、分别表达多杀性巴氏杆菌toxA基因C端和N端的重组支气管败血波氏杆菌QH0814AaroA/toxAC和QH0814△aroA/toxAN。本研究将上述4种猪萎缩性鼻炎基因重组菌株作为候选疫苗,通过免疫断奶仔猪,比较不同基因重组菌株及不同免疫途径所产生的免疫应答,综合评价基因工程疫苗的免疫效果,期望筛选出一种安全、有效的基因重组疫苗,为猪萎缩性鼻炎的防控及净化提供方案和数据支撑。主要研究内容如下：1.4种基因重组疫苗菌株冻干工艺的优化分别以终浓度为10%、12.5%或15%的脱脂牛奶和5%的蔗糖的三种溶液作为基因重组疫苗的冻干保护剂,并在-40℃下预冻3h-5h后对疫苗进行冻干,利用平板计数法对冻干前后的活菌量进行计数,比较同一批次的菌株在不同浓度脱脂牛奶的冻干保护剂条件下的存活率,和同一批次菌株在同一浓度冻干保护剂下的不同预冻时间的存活率,结果表明终浓度为12.5%脱脂牛奶、5%蔗糖的溶液作为冻干保护剂,疫苗菌株的存活率最高,达到84.3%以上,最高活菌量达到5.22×1010CFU/ml。2.基因重组疫苗的安全性将4种基因重组菌株分为C501（PYA-F1P2）和C501（PYA-toxA）联合组,QH0814AaroA/toxAC组和QH0814△aroA/toxAN组3组候选疫苗,以合适免疫剂量接种28日龄仔猪,接种后7d内测量受试猪的体温,观察食欲、精神状况等,计算仔猪接种后30d的平均日增重,结果显示：受试猪健康状况良好,无明显不良反应,30d的平均日增重与对照组相比差异不明显,因此候选疫苗对仔猪具有良好的安全性；候选疫苗分别按滴鼻和肌肉注射的免疫方式接种仔猪,每天采集猪鼻腔拭子和圈舍内的水样、粪便,并将样本处理后进行PCR扩增,鉴定重组菌株的目的基因,结果显示：滴鼻免疫组的鼻拭子在接种第7天便检测不到基因重组菌株,而肌肉注射组的鼻拭子以及各组所在环境中的水样和粪便中始终未检到基因重组菌株,说明这4种疫苗菌株接种仔猪后只能在鼻腔中短期定殖,并且不会向周围环境中释放。3.基因重组疫苗最佳免疫剂量及其免疫方式的确定分别将3组候选疫苗稀释成不同梯度的免疫剂量,各组均以滴鼻和肌肉注射两种免疫方式免疫28日龄仔猪,分别在免疫后第7d、14d、21d和28d采集鼻拭子及血样,用ELISA方法检测T+Pm和Bb抗体水平,在免疫后7d内测量仔猪体温,观察仔猪的精神和采食情况,结果表明,疫苗免疫后均无不良反应,C501（PYA-F1P2）和C501（PYA-toxA）联合组的最佳免疫剂量为肌肉注射免疫5×109CFU/头；QH0814△aroA/toxAC和QH0814AaroA/toxAN滴鼻免疫的最佳免疫剂量均为6×109CFU/头,而肌肉注射免疫的最佳免疫剂量均为3×109CFU/头。4.基因重组疫苗对仔猪的免疫效力试验将4种重组疫苗以最佳免疫剂量接种28日龄仔猪,首免2周后加强免疫一次,分别在首免前、首免后14d、28d采集鼻拭子及血样,检测鼻腔粘液及血清中T+pm和Bb的IgA、IgG抗体水平。结果显示：基因重组疫苗能诱使仔猪产生针对T+Pm和Bb较高的抗体水平,而对照组的抗体水平则无升高。5.不同基因重组疫苗间以及与同类疫苗的对比试验将4种重组疫苗按照最佳免疫剂量接种28日龄仔猪,同时以进口商品化疫苗和自制二价细菌灭活苗为对照,免疫后测量各试验组仔猪体温、体重,观察并记录采食量等生产指标,计算仔猪免疫后平均日增重、料肉比,结果显示：除二价细菌灭活苗组的仔猪免疫后24h内有体温略微升高,采食量下降外,其他接种猪健康状况一直保持良好,候选疫苗组仔猪的鼻腔及血清中T+pm和Bb抗体水平均略低于进口疫苗组和二价全菌灭活苗组。仔猪的平均日增重差异不显着。与非免疫对照组相比,料肉比及药物使用量均有所降低。QH0814AaroA/toxAN与QH0814△aroA/toxAN联合免疫组和单独免疫组之间无明显的差异,但略高于C501（PYA-F1P2）和C501（PYA-toxA）联合免疫组,由此表明基因工程疫苗的免疫效果与其它疫苗组无较大差异,且具有一定的临床效果。
孙进[9]（2013）在《皖北地区猪源支气管败血波氏杆菌感染的流行病学调查及防制技术研究》文中提出支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica, Bb）是一种重要的病原菌,能广泛感染家禽类、家畜、野生动物和实验动物,是猪传染性萎缩性鼻炎的病原之一。猪群感染后临床症状表现为打喷嚏、流鼻血,严重的表现为颜面变形、鼻部歪斜,造成猪生长迟滞,饲料转化率降低,给集约化养猪业造成巨大的经济损失。本研究选取皖北地区12个规模化养猪场作为研究对象,通过实地调研、流行病学研究等方法对该地区猪源支气管败血波氏杆菌感染进行流行病学调查,并从耐药谱、中药制剂防治效果、自家苗免疫效果等方面进行研究,探讨该地区该菌感染的防治方法和措施。1、选取皖北地区12个规模化养猪场,通过实地调研,流行病学研究,观察发病猪的临床症状、病理变化结合病原初步检查和PCR检查等方法,调查支气管败血波氏杆菌在本地区的感染率以及饲养管理条件、环境因素对该病的影响。结果表明,支气管败血波氏杆菌在皖北地区12个猪场均有感染,程度不一,样品最高阳性率高达37.17%。本病有明显的季节性,冬季和春季感染率分别为25.63%和28.05%,明显高于夏季和秋季。同时,30-60日龄仔猪病料阳性率最高,为30.90%。此外,环境卫生条件、饲养因素、营养状况、管理水平等应激因素可以成为本病发生的诱因。为此,加强饲养管理,保持猪舍通风干燥、保持猪舍饲养密度,保障饲料中的钙磷等物质,对于该病的防治具有积极的作用。2、采集猪肺脏和鼻拭子样本148份进行支气管败血波氏杆菌的分离和鉴定,获得12株支气管败血波氏杆菌,药敏试验显示以上菌株对氟苯尼考、强力霉素、链霉素、庆大霉素最为敏感,对红霉素、丁胺卡那、氧氟沙星、四环素、氨苄西林中度敏感,对复方磺胺、万古霉素、痢特灵、氯霉素、头孢唑啉等药物不敏感。3、将中药制剂用于皖北地区猪支气管败血波氏杆菌感染的治疗和预防,并设置氟苯尼考用药效果对照组。结果显示：中药制剂对猪群的平均保护率为89.5%,高于对照组的保护率（84.9%）；治疗率为79.2%,低于对照组的治愈率（88.0%）。说明该中药制剂在该地区支气管败血波氏杆菌感染的预防和治疗中有良好的效果。4、选取支气管败血波氏杆菌优势菌株B1制成Ⅰ相菌铝胶灭活疫苗,与商品苗在同一个养殖场免疫仔猪,进行防制效果对比试验。结果表明：自制灭活疫苗组、商品化灭活苗组和空白对照组的感染率分别为16%,18%和56%。说明选择本养殖场分离的优势菌株制备的自家苗,对该养殖场猪群具有免疫保护功能,可用于生产实践。
李国江,郑伟,刘彪,宋英华,尹柏双[10]（2012）在《规模化猪场传染性萎缩性鼻炎病原学调查与分析》文中进行了进一步梳理本试验对吉林部分地区规模化猪场进行猪传染性萎缩性鼻炎病原学调查。采集吉林不同地区6个规模化猪场阳性猪鼻腔黏液148份,进行病原菌的分离与鉴定。结果表明,148头猪中有84头被支气管败血波氏杆菌感染,占56.76%;被产毒素多杀巴氏杆菌感染53头,占35.81%;混合感染的11头,占7.43%。结果提示,吉林地区规模化猪场中猪传染性萎缩性鼻炎多以支气管败血波氏杆菌感染为主,混合感染程度轻微。
二、宁夏集约化养猪场猪传染性萎缩性鼻炎的防治研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、宁夏集约化养猪场猪传染性萎缩性鼻炎的防治研究（论文提纲范文）
（1）一例猪传染性萎缩性鼻炎的诊疗措施分析（论文提纲范文）
| 1 病例 |
| 2 病原 |
| 2.1 支气管波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌 |
| 3 流行病学 |
| 4 防治措施 |
| 4.1 预防 |
| 4.2 治疗 |
| 5 诊疗注意事项 |
（2）猪传染性萎缩性鼻炎的防治措施（论文提纲范文）
| 1 临床症状 |
| 2 流行特点 |
| 3 传播途径 |
| 4 预防措施 |
| 4.1 加强饲养管理 |
| 4.2 做好环境卫生管理 |
| 4.3 免疫措施 |
| 5 小结 |
（3）山东省规模猪场支原体肺炎与传染性萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控技术研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 猪支原体肺炎 |
| 1.1.1 MPS的流行病学 |
| 1.1.2 MPS的致病机制 |
| 1.1.3 MPS的临床症状 |
| 1.1.4 MPS的病理变化 |
| 1.1.5 MPS的诊断方法 |
| 1.2 Mhp的病原学特征 |
| 1.3 猪传染性萎缩性鼻炎(AR) |
| 1.3.1 AR的流行病学 |
| 1.3.2 AR的发病机制 |
| 1.3.3 AR的临床症状 |
| 1.3.4 AR的病理变化 |
| 1.3.5 AR的诊断方法 |
| 1.3.6 AR的病原学特征 |
| 1.4 研究目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要试验试剂与耗材 |
| 2.2 主要仪器设备及器材 |
| 2.3 试验所用试剂配制方法 |
| 2.4 样品采集 |
| 2.5 PCR检测引物序列及反应体系 |
| 2.6 qPCR反应体系 |
| 3 试验方法 |
| 3.1 山东部分地区规模化猪场支原体病原学检测 |
| 3.2 屠宰生猪肺脏健康状况评估和组织病理学检查方法 |
| 3.2.1 100分制屠宰生猪肺脏病变评估方法 |
| 3.2.2 屠宰生猪肺脏病理学检查方法 |
| 3.3 试验猪场Mhp病原检测 |
| 3.4 试验猪场支原体ELISA抗体检测 |
| 3.5 试验猪场CSFV、PRRSV、PRV、PCV2 血清抗体ELISA检测 |
| 3.6 Mhp培养鉴定 |
| 3.7 Mhp分离菌株药敏试验 |
| 3.8 猪传染性萎缩性鼻炎病理学检查 |
| 3.9 猪传染性萎缩性鼻炎PCR检测 |
| 3.10 试验场AR病原学检测 |
| 4 结果 |
| 4.1 山东部分地区规模化猪场支原体病原学检测结果 |
| 4.2 屠宰生猪肺脏健康状况评估和组织病理学检查结果 |
| 4.2.1 试验场屠宰生猪肺脏病变评估结果 |
| 4.2.2 试验场屠宰生猪肺脏病理学检查结果 |
| 4.3 试验场Mhp病原检测结果 |
| 4.4 试验场Mhp抗体水平检测结果 |
| 4.5 试验场MPS疫苗免疫后对其他疫苗抗体水平的影响分析结果 |
| 4.6 Mhp培养鉴定 |
| 4.7 Mhp分离菌株药敏试验结果 |
| 4.8 AR病理学检查结果 |
| 4.9 试验场AR PCR检测结果 |
| 5 讨论 |
| 5.1 山东部分地区规模化猪场支原体病原学检测结果分析 |
| 5.2 MPS疫苗免疫程序调整前后屠宰生猪肺脏健康状况评估 |
| 5.3 猪场MPS疫苗免疫前后病原学检测情况 |
| 5.4 MPS疫苗免疫前后抗体水平 |
| 5.5 MPS疫苗免疫后对猪群其他疫苗免疫抗体水平的影响 |
| 5.6 Mhp分离菌株药物敏感试验 |
| 5.7 AR疫苗免疫前后病原学检测 |
| 6 结论 |
| 7 参考文献 |
| 8 致谢 |
| 9 硕士期间发表论文情况 |
（4）副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 猪场细菌性疾病概述 |
| 1.1.1 我国猪细菌性疾病的流行特点 |
| 1.1.2 猪链球菌病 |
| 1.1.3 副猪嗜血杆菌病 |
| 1.1.4 猪萎缩性鼻炎 |
| 1.1.5 猪大肠杆菌病 |
| 1.1.6 猪传染性胸膜肺炎 |
| 1.1.7 仔猪副伤寒 |
| 1.1.8 猪丹毒 |
| 1.2 细菌耐药性概述 |
| 1.2.1 细菌耐药现状 |
| 1.2.2 细菌耐药机制 |
| 1.2.2.1 由细菌膜和外排泵介导的耐药 |
| 1.2.2.2 抗生素结构的改变 |
| 1.2.2.3 抗生素作用靶点改变 |
| 1.2.2.4 细菌状态改变 |
| 1.2.3 减少细菌耐药性的策略 |
| 1.3 细菌群体感应系统概述 |
| 1.3.1 群体感应系统简介 |
| 1.3.2 Lux S/AI-2 群体感应系统 |
| 1.3.3 群体感应系统与细菌生物膜 |
| 1.3.4 群体感应系统与细菌的环境压力应激 |
| 1.3.5 群体感应系统与细菌毒力 |
| 1.3.6 群体感应系统的受体分子 |
| 1.3.7 群体感应系统的临床意义 |
| 1.4 转录组学技术研究及应用 |
| 1.4.1 转录组学概述 |
| 1.4.2 RNA-Seq在转录组学研究中的应用 |
| 1.5 细菌热应激调控的分子机制 |
| 1.6 立题依据 |
| 第二章 猪场病原菌感染调查及耐药性研究 |
| 2.1 研究的目的与意义 |
| 2.2 试验材料 |
| 2.2.1 主要试剂 |
| 2.2.2 主要仪器 |
| 2.2.3 培养基的配置 |
| 2.2.4 PCR引物 |
| 2.2.4.1 细菌鉴定引物 |
| 2.2.4.2 猪链球菌分型引物 |
| 2.2.4.3 副猪嗜血杆菌分型引物 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 样品收集 |
| 2.3.2 细菌分离 |
| 2.3.3 PCR鉴定 |
| 2.3.3.1 细菌种属的PCR鉴定 |
| 2.3.3.2 猪链球菌和副猪嗜血杆菌的血清型鉴定 |
| 2.3.4 药敏试验 |
| 2.3.5 数据分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 样品来源的地区分布 |
| 2.4.2 样品的组织种类 |
| 2.4.3 病原菌的组成及分离率 |
| 2.4.4 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的季节性分布 |
| 2.4.5 猪链球菌和副猪嗜血杆菌的血清型 |
| 2.4.6 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的耐药性 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 样品信息分析 |
| 2.5.2 病原菌的流行特点分析 |
| 2.5.3 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的季节性感染特点 |
| 2.5.4 猪链球菌的副猪嗜血杆菌的血清型特征 |
| 2.5.5 猪链球菌、副猪嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌的耐药率比较 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌Lux S/AI-2 群体感应系统的功能研究 |
| 3.1 研究的目的与意义 |
| 3.2 试验材料 |
| 3.2.1 主要试剂 |
| 3.2.2 主要质粒、菌株和细胞 |
| 3.2.3 试验动物 |
| 3.2.4 主要仪器 |
| 3.2.5 培养基配置 |
| 3.2.6 各类PCR引物 |
| 3.2.6.1 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失菌株构建引物 |
| 3.2.6.2 HPS基因缺失互补菌株构建引物 |
| 3.2.6.3 HPS基因缺失菌株和互补菌株验证引物 |
| 3.2.6.4 其他引物 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 luxS基因序列同源性分析 |
| 3.3.2 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失和互补菌株的构建及验证 |
| 3.3.2.1 副猪嗜血杆菌基因组提取 |
| 3.3.2.2 质粒小量提取 |
| 3.3.2.3 质粒大量提取 |
| 3.3.2.4 重组质粒p K18mobsacb-UKD的构建及验证 |
| 3.3.2.5 自然转化 |
| 3.3.2.6 重组质粒p SHK3-C-lux S的构建及验证 |
| 3.3.2.7 副猪嗜血杆菌无细胞提取物(CFEs)提取 |
| 3.3.2.8 CFEs体外甲基化质粒 |
| 3.3.2.9 电转化感受态细胞制备 |
| 3.3.2.10 电转化步骤与转化子鉴定 |
| 3.3.3 AI-1和AI-2分子的检测 |
| 3.3.4 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株生长曲线的测定 |
| 3.3.5 压力应激试验 |
| 3.3.6 生物膜形成试验 |
| 3.3.7 自身凝集试验 |
| 3.3.8 红细胞凝集试验 |
| 3.3.8.1 2%健康猪红细胞悬浮液的制备 |
| 3.3.8.2 血凝试验 |
| 3.3.9 粘附试验 |
| 3.3.10 半数致死量试验(LD50) |
| 3.3.11 小鼠组织载菌量的测定 |
| 3.3.12 透射电子显微镜样品准备及形态观察 |
| 3.3.13 统计学分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 luxS基因在不同菌株中的同源性 |
| 3.4.2 副猪嗜血杆菌luxS基因缺失株和互补株的构建及验证 |
| 3.4.3 AI-1和AI-2分子的活性检测 |
| 3.4.4 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株生长曲线的测定 |
| 3.4.5 压力应激试验 |
| 3.4.6 ΔluxS菌株生物膜形成能力显着增强 |
| 3.4.7 ΔluxS菌株自身凝集能力显着减弱 |
| 3.4.8 ΔluxS菌株血凝能力显着减弱 |
| 3.4.9 Δlux S菌株粘附PK-15 细胞的能力减弱 |
| 3.4.10 ΔluxS菌株毒力显着减弱 |
| 3.4.11 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株的组织载菌量 |
| 3.4.12 HPS2、Δlux S和 C-lux S菌株的形态观察 |
| 3.5 讨论 |
| 3.5.1 LuxS基因序列同源性分析 |
| 3.5.2 luxS基因缺失和互补菌株的构建策略分析 |
| 3.5.3 luxS基因缺失株和互补株的生长特性比较 |
| 3.5.4 Lux S基因参与HPS调控环境应激 |
| 3.5.5 副猪嗜血杆菌群体感应系统AI-2分子的表达规律 |
| 3.5.6 副猪嗜血杆菌luxS基因与生物膜的关系 |
| 3.5.7 群体感应系统与副猪嗜血杆菌毒力 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌群体感应系统缺失株转录组学及其抵抗热应激机制研究 |
| 4.1 研究的目的与意义 |
| 4.2 试验材料 |
| 4.2.1 主要试剂 |
| 4.2.2 主要仪器 |
| 4.2.3 实验数据分析软件 |
| 4.2.4 试验菌株 |
| 4.2.5 PCR引物 |
| 4.2.5.1 定量检测引物 |
| 4.2.5.2 副猪嗜血杆菌rse A和 rpo E基因缺失株构建引物 |
| 4.3 试验方法 |
| 4.3.1 RNA-Seq测序样品的准备 |
| 4.3.2 细菌RNA的提取 |
| 4.3.3 RNA样品中DNA的去除 |
| 4.3.4 反转录cDNA |
| 4.3.5 RNA-Seq测序与分析 |
| 4.3.5.1 总RNA样品检测 |
| 4.3.5.2 文库构建 |
| 4.3.5.3 库检和测序 |
| 4.3.5.4 生物信息分析 |
| 4.3.6 荧光定量PCR |
| 4.3.7 副猪嗜血杆菌rse A和 rpo E基因缺失株的构建及生长曲线的测定 |
| 4.3.8 热应激试验 |
| 4.3.9 统计学分析 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 RNA样品的质量检测 |
| 4.4.1.1 RNA样品的浓度测定 |
| 4.4.1.2 RNA样品的电泳检测 |
| 4.4.1.3 RNA测序样品的选择 |
| 4.4.2 测序数据质量评估 |
| 4.4.3 参考序列比对分析 |
| 4.4.4 基因表达水平分析 |
| 4.4.5 RNA-Seq样品质量评估 |
| 4.4.6 RNA-Seq差异表达基因 |
| 4.4.7 RNA-Seq差异基因GO富集 |
| 4.4.8 差异基因KEGG富集分析 |
| 4.4.9 差异基因的RT-q PCR验证 |
| 4.4.10 副猪嗜血杆菌rseA基因缺失株和rpoE基因缺失株的构建及验证 |
| 4.4.11 HPS2,Δrse A和 Δrpo E菌株的生长特性 |
| 4.4.12 rse A和 rpo E基因对副猪嗜血杆菌抵抗热应激的影响 |
| 4.4.13 副猪嗜血杆菌热应激相关调节基因的转录水平 |
| 4.5 讨论 |
| 4.5.1 转录组测序样品的准备 |
| 4.5.2 测序数据的处理和质量评估 |
| 4.5.3 基因表达水平分析 |
| 4.5.4 差异表达基因功能分析 |
| 4.5.5 差异基因富集分析 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 受体蛋白RbsB1在副猪嗜血杆菌群体感应系统中的作用 |
| 5.1 研究的目的与意义 |
| 5.2 试验材料 |
| 5.2.1 主要试剂 |
| 5.2.2 主要质粒菌株 |
| 5.2.3 主要仪器 |
| 5.2.4 主要培养基的配置 |
| 5.2.5 主要PCR引物 |
| 5.2.5.1 HPS2 rbs B1 基因缺失株构建引物 |
| 5.2.5.2 PCR引物 |
| 5.3 试验方法 |
| 5.3.1 rbsB1基因序列的同源性分析 |
| 5.3.2 副猪嗜血杆菌rbsB1基因缺失株的构建、验证及生长曲线的测定 |
| 5.3.3 RbsB1蛋白的表达 |
| 5.3.3.1 重组质粒pet28a-rbs B1 的构建 |
| 5.3.3.2 RbsB1蛋白的诱导表达 |
| 5.3.3.3 RbsB1蛋白的纯化 |
| 5.3.3.4 RbsB1蛋白的检测 |
| 5.3.4 rbsB1基因转录水平的定量检测 |
| 5.3.5 AI-2分子的检测 |
| 5.3.6 统计学分析 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.4.1 rbsB1基因在不同菌株中的同源性 |
| 5.4.2 rbsB1基因在不同菌株中的转录水平 |
| 5.4.3 副猪嗜血杆菌rbsB1基因缺失株的构建及验证 |
| 5.4.4 HPS2和Δrbs B1 菌株生长曲线的测定 |
| 5.4.5 RbsB1蛋白的表达与鉴定 |
| 5.4.6 HPS2和Δrbs B1 菌株培养上清中AI-2 分子的表达水平 |
| 5.4.7 Rbs B1 蛋白与AI-2 分子的相互作用 |
| 5.5 讨论 |
| 5.5.1 rbsB1基因的同源性分析 |
| 5.5.2 Rbs B1 受体蛋白与群体感应系统AI-2 分子的相互作用 |
| 5.6 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 基本信息 |
| 致谢 |
（5）猪传染性萎缩性鼻炎防治（论文提纲范文）
| 1 病理特征 |
| 2 预防措施 |
| 2.1 实施合理的饲养管理 |
| 2.2 严格控制饲养环境 |
| 2.3 定时进行免疫接种 |
| 2.4 注重药物防治 |
| 3 总结 |
（6）一种猪萎缩性鼻炎疫苗在猪场的安全性评价及其应用效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 猪萎缩性鼻炎概述 |
| 1.2.1 AR病原学特征及理化特性 |
| 1.2.2 AR的流行病学特征 |
| 1.2.3 AR致病机理 |
| 1.2.4 AR临床特征及病理变化 |
| 1.3 国内外研究进展 |
| 1.3.1 诊断方法 |
| 1.3.2 AR的综合防治 |
| 1.3.3 AR疫苗研究进展 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 第二章 猪萎缩性鼻炎疫苗在猪场的安全性评价 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 疫苗安全性评价方法 |
| 2.2.1 试验设计 |
| 2.2.2 数据处理 |
| 2.2.3 免疫程序及操作要点 |
| 2.3 结果分析 |
| 2.3.1 疫苗免疫对母猪的体温、采食量、流产率指标的影响 |
| 2.3.2 疫苗免疫对母猪繁殖性能指标的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 疫苗应用效果的研究 |
| 3.1 免疫后猪群萎鼻发病情况调查评估 |
| 3.1.1 评估方法 |
| 3.1.2 实验设计 |
| 3.1.3 评估结果及其分析 |
| 3.1.4 讨论 |
| 3.2 疫苗经济效益评价 |
| 3.2.1 疫苗及抗生素成本 |
| 3.2.2 经济效益评价指标 |
| 3.2.3 评价方法 |
| 3.2.4 实验设计 |
| 3.2.5 数据处理分析 |
| 3.2.6 评价结果与分析 |
| 3.2.7 讨论 |
| 全文总结 |
| 实验创新点与不足 |
| 实验改进之处 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素（PMT）单克隆抗体的制备（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 猪呼吸道疾病综合征 |
| 1.1 猪链球菌及其分型进展 |
| 1.1.1 猪链球菌 |
| 1.1.2 猪链球菌分型技术原理及应用 |
| 1.1.3 猪链球菌药敏试验进展 |
| 1.2 副猪嗜血杆菌及耐药性研究进展 |
| 1.2.1 副猪嗜血杆菌 |
| 1.2.2 副猪嗜血杆菌耐药性研究进展 |
| 1.3 猪多杀性巴氏杆菌 |
| 1.4 支气管败血波氏杆菌 |
| 1.5 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 猪萎缩性鼻炎 |
| 2.1 多杀性巴氏杆菌病原学 |
| 2.1.1 形态特征及培养特性 |
| 2.1.2 理化特征 |
| 2.1.3 血清型 |
| 2.1.4 病原蛋白 |
| 2.2 多杀性巴氏杆菌流行病学 |
| 2.3 PMT的检测 |
| 2.4 研究的目的与意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离和猪链球菌血清型鉴定 |
| 1 材料方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 病料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 培养基的配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细菌的分离和鉴定 |
| 1.2.2 链球菌的血清分型 |
| 2 结果 |
| 2.1 细菌的革兰氏染色 |
| 2.2 细菌分离鉴定结果 |
| 2.3 猪链球菌血清分型结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 猪呼吸道疾病综合征细菌的耐药性分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 产毒素多杀性巴氏杆菌分离、鉴定 |
| 1.3 药物敏感性实验 |
| 1.4 耐药质粒的提取及分析 |
| 1.5 质粒稳定性检测 |
| 2 结果 |
| 2.1 PCR检测结果 |
| 2.2 巴氏杆菌药敏实验 |
| 2.3 猪链球菌的耐药性检测结果 |
| 2.4 副猪嗜血杆菌的耐药性检测结果 |
| 2.5 质粒序列分析 |
| 2.6 质粒稳定检测 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)单克隆抗体的制备及初步鉴定 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 细胞、实验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 免疫原的制备 |
| 1.4 小鼠免疫 |
| 1.5 间接ELISA方法测定血清抗体效价 |
| 1.6 细胞融合 |
| 1.6.1 SP2/0骨髓瘤细胞的准备 |
| 1.6.2 饲养细胞的准备 |
| 1.6.3 免疫脾细胞的制备 |
| 1.6.4 细胞融合 |
| 1.6.5 阳性杂交瘤细胞株的筛选与亚克隆 |
| 1.7 单克隆抗体的鉴定 |
| 1.7.1 单克隆抗体的特异性鉴定 |
| 1.7.2 单克隆抗体细胞株的稳定性试验 |
| 1.7.3 单抗Ig亚型鉴定 |
| 1.7.4 单抗抗原位点分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 抗原蛋白的表达及纯化 |
| 2.2 杂交瘤细胞株的筛选及克隆化培养结果 |
| 2.3 单抗的特异性鉴定 |
| 2.4 单抗的Ig亚型鉴定 |
| 2.5 杂交瘤细胞株的分泌稳定性 |
| 2.6 单抗的抗原位点分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（8）猪萎缩性鼻炎基因重组疫苗的比较研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 1 文献综述 |
| 1.1 猪萎缩性鼻炎 |
| 1.1.1 病原学 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.1.3 综合防控 |
| 1.2 产毒素多杀性巴氏杆菌主要毒力因子的研究进展 |
| 1.2.1 PMT毒素的特性研究 |
| 1.2.2 PMT毒素的免疫原性片段研究 |
| 1.3 支气管败血波氏杆菌主要毒力因子研究进展 |
| 1.3.1 毒力因子的特性研究 |
| 1.3.2 Bb免疫原性片段研究 |
| 1.4 猪萎缩性鼻炎疫苗研究进展 |
| 1.4.1 灭活苗 |
| 1.4.2 弱毒苗、亚单位疫苗与基因工程苗 |
| 2 研究目的与意义 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 菌株 |
| 3.1.2 试验动物 |
| 3.1.3 酶和试剂 |
| 3.1.4 主要培养基及其配制 |
| 3.1.5 缓冲液及试剂配制 |
| 3.1.6 引物 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 疫苗的制备 |
| 3.2.2 抗体间接ELISA检测方法的建立 |
| 3.2.3 仔猪Bb和T~+Pm母源抗体消长规律的测定 |
| 3.2.4 重组疫苗的安全性测定 |
| 3.2.5 重组疫苗菌株最佳免疫剂量的测定 |
| 3.2.6 重组疫苗间及与其它疫苗的免疫效果对比 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 疫苗的制备 |
| 4.1.1 重组疫苗菌株的鉴定 |
| 4.1.2 重组疫苗冻干条件的优化 |
| 4.1.3 疫苗的制备 |
| 4.2 T~+Pm、Bb抗体间接ELISA检测方法的建立 |
| 4.3 试验猪场仔猪免疫方案和母源抗体消长规律研究 |
| 4.4 重组疫苗对猪的安全性 |
| 4.4.1 重组疫苗对仔猪的安全性 |
| 4.4.2 重组疫苗对环境的安全性 |
| 4.5 重组疫苗对仔猪的最佳免疫剂量 |
| 4.5.1 断奶仔猪的抗体水平检测结果 |
| 4.5.2 免疫猪只健康状况及体温监测 |
| 4.6 重组疫苗间及与其它疫苗的效果对比试验 |
| 4.6.1 不同疫苗对仔猪的免疫效力 |
| 4.6.2 仔猪免疫后观察情况 |
| 4.6.3 仔猪生长情况 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）皖北地区猪源支气管败血波氏杆菌感染的流行病学调查及防制技术研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 支气管败血波氏杆菌基本情况和危害 |
| 2 支气管败血波氏杆菌病原学及其生物学特征 |
| 3 流行病学状况和致病机理 |
| 4 临床症状和病理变化 |
| 5 诊断方法 |
| 5.1 细菌学诊断 |
| 5.2 血清学诊断 |
| 5.3 分子生物学诊断 |
| 6 预防与控制措施 |
| 7 选题依据 |
| 参考文献 |
| 第二章 皖北地区猪源支气管败血波氏杆菌感染的流行病学调查 |
| 摘要 |
| 1 流行病学调查方法 |
| 1.1 调查范围 |
| 1.2 调查对象 |
| 1.3 受害动物群体的背景及现状资料 |
| 1.4 病料采集 |
| 1.5 基因组提取 |
| 1.6 PCR检测 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床症状及剖检变化 |
| 2.2 皖北地区支气管败血波氏杆菌感染情况 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 第三章 皖北地区猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药谱调查 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 分离菌的培养特性 |
| 2.2 分离菌生化鉴定 |
| 2.3 细菌血清学鉴定 |
| 2.4 PCR鉴定结果 |
| 2.5 抗生素药敏试验 |
| 2.6 小鼠毒力试验 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 第四章 中药对支气管败血波氏杆菌防治效果研究 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 治疗试验 |
| 2.2 预防试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 第五章 自家灭活苗免疫保护试验研究 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 菌苗的无菌检验 |
| 2.2 菌苗安全性检验 |
| 2.3 菌苗免疫效果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 全文总结 |
| 致谢 |
四、宁夏集约化养猪场猪传染性萎缩性鼻炎的防治研究（论文参考文献）
- [1]一例猪传染性萎缩性鼻炎的诊疗措施分析[J]. 王菲. 中国动物保健, 2021(08)
- [2]猪传染性萎缩性鼻炎的防治措施[J]. 吴国志. 吉林畜牧兽医, 2020(06)
- [3]山东省规模猪场支原体肺炎与传染性萎缩性鼻炎流行病学调查及免疫防控技术研究[D]. 焦秋林. 山东农业大学, 2020(12)
- [4]副猪嗜血杆菌LuxS/AI-2群体感应系统研究[D]. 张丙周. 华中农业大学, 2020(02)
- [5]猪传染性萎缩性鼻炎防治[J]. 李连平. 中国畜禽种业, 2018(11)
- [6]一种猪萎缩性鼻炎疫苗在猪场的安全性评价及其应用效果的研究[D]. 叶真伟. 湖南农业大学, 2018(09)
- [7]猪呼吸道疾病综合征细菌性病原的分离鉴定和多杀性巴氏杆菌毒素（PMT）单克隆抗体的制备[D]. 王美芬. 南京农业大学, 2018(07)
- [8]猪萎缩性鼻炎基因重组疫苗的比较研究[D]. 张洁. 华中农业大学, 2013(02)
- [9]皖北地区猪源支气管败血波氏杆菌感染的流行病学调查及防制技术研究[D]. 孙进. 南京农业大学, 2013(08)
- [10]规模化猪场传染性萎缩性鼻炎病原学调查与分析[J]. 李国江,郑伟,刘彪,宋英华,尹柏双. 中国畜牧兽医, 2012(11)