一、微波石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用（论文文献综述）
王浥霏,张闽,李晓未,李萍[1]（2020）在《小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术的应用研究》文中研究指明目的:探讨小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术的应用价值。方法:在本院范围内,以2019年6月至2020年6月为时间节点,选取肾病患儿70例,于B超引导下,实施经皮肾穿刺活检,进行冰冻切片（做Fibrinogen、C3、IgG、IgA、IgM、C1q染色）与石蜡切片（做Masson、PAS、HE、PASM等染色）。结果:石蜡切片所采用的4种染色有着鲜明的对比,且各种病理改变都比较清晰,肾小球数量≥10个。冰冻切片有着比较清晰的免疫荧光染色背景,肾小球数量都≥5个,未形成冰晶,且有着明确的荧光标记,全部病种都能够在病变对应部位找到呈颗粒状、线状或者团块状的黄绿色荧光。结论:在小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查中,通过对样本的处理方法进行改进与优化,有助于制片质量的提升,能为小儿肾病诊断准确率的提升提供切实保障。
张帆,喻小娟,王素霞,屈磊,马依依,刘刚,杨莉[2]（2020）在《常用的免疫病理方法在轻链型肾淀粉样变性分型中的作用》文中研究指明目的探讨常用的免疫病理方法在轻链型肾淀粉样变性分型中的作用。方法选择北京大学第一医院肾内科经肾活检病理包括刚果红染色及电镜检查确诊的34例肾淀粉样变性患者为研究对象,根据冰冻组织保存的质量分为保存良好组（26例）和保存不佳组（8例）,所有肾活检标本分别进行冰冻切片免疫荧光（F-IF）、石蜡切片免疫荧光（P-IF）及石蜡切片免疫组织化学（IHC）的轻链标记染色,比较3种方法在轻链型淀粉样变性分型中的灵敏度和特异性。结果 26例冰冻组织保存良好组中,均可经冰冻切片免疫荧光染色确诊为轻链型淀粉样变性,非特异组织背景染色低,κ和λ轻链荧光强度差距大,灵敏度和特异性高,结果可靠。对此26例患者的石蜡切片进一步行免疫组化和免疫荧光检查发现,65.4%患者可以通过免疫组化正确分型,但κ和λ轻链组化染色强度差距减小、非特异的组织背景染色深;只有53.8%患者可以通过石蜡荧光正确分型,κ和λ轻链荧光染色强度差距小。进一步对8例冰冻组织保存欠佳的患者进行石蜡荧光、免疫组化染色分型,100%患者通过免疫组化确定为轻链型淀粉样变性,75%患者通过石蜡荧光确诊为轻链型淀粉样变性。结论轻链型淀粉样变性肾病的分型诊断中,首选灵敏度和特异性最好的冰冻免疫荧光染色方法;无冰冻组织或者冰冻组织保存不佳患者,可选择免疫组化或石蜡切片免疫荧光方法作为补救的分型方法。
周雅丽,李远,郭佳,邢国兰,刘章锁[3]（2020）在《肾组织石蜡切片免疫荧光技术中抗原修复方法的探讨》文中研究表明目的 比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用,探讨最佳抗原修复法。方法 选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象,其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例。分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片。按照标本来源和抗原修复方法分为6组：对照组（冰冻切片标本）、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复（高压热联合胰酶）组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复（微波热联合胰酶）组、高压热修复（高压热）组、微波热修复（微波热）组、胃蛋白酶消化（胃蛋白酶）组。分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异。结果 高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致,与对照组比较,两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义（均P>0.05）。高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高,免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义（均P<0.05）。结论 高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法。
弓玉祥,陈平圣,杨旻宇[4]（2020）在《石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用》文中研究表明在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。
田东丽[5]（2019）在《腺苷1型受体在糖尿病肾病小管间质损伤中不依赖于管球反馈的机制初探》文中进行了进一步梳理研究背景糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）作为糖尿病最常见的微血管并发症之一,是导致终末期肾病（End Stage Renal Disease,ESRD）的重要原因。越来越多的证据显示肾小管间质病变是DN发生发展的独立危险因素。因此,研究糖尿病时肾小管、肾小管周毛细血管（Peritubular Capillary,PTC）及间质微环境改变的机制和效应,有助于寻找治疗DN新的干预位点。腺苷1型受体（A1 Adenosine Receptor,A1AR）在肾脏广泛表达,因其在肾脏管球反馈（Tubulo-glomerular Feedback,TGF）中的重要调控作用而受到广泛关注,我们前期研究观察到DN时,A1AR基因敲除,加重DN但与TGF无关。而在造影剂肾病和缺血再灌注动物模型中,观察到A1AR存在不依赖于管球反馈的肾脏保护作用,DN时是否存在相似的情况,具体机制并不清楚。研究目的本研究将通过DN患者、A1AR基因敲除（A1AR-/-）DN小鼠动物模型和体外细胞实验,从组织器官、细胞和分子水平观察A1AR缺失对于DN肾小管周微环境（肾小管、间质和肾小管周毛细血管）非依赖于管球反馈的损伤机制,了解激活A1AR对蛋白尿发生和肾脏纤维化机制的保护作用。1.建立A1AR缺失DN小鼠动物模型,通过肾脏mRNA基因芯片谱检测筛选差异表达基因,寻找A1AR参与DN发展的可能分子调节通路;2.在DN患者、小鼠模型中观察A1AR缺失加重肾小管周微环境损伤,保护刷状缘转运蛋白Megalin破坏和小管间质纤维化的可能机制;3.体外细胞培养验证A1AR对高糖环境下近端小管上皮细胞损伤的保护作用;进而为DN防治提供新的思路和潜在的干预位点;4.观察A1AR在DN水盐代谢相关高血压中的调节作用及可能机制。研究方法第一部分 DN模型的确立及A1AR参与DN的分子通路初筛1.纳入肾活检证实为糖尿病肾病患者,年龄性别匹配的肾小球轻微病变作为对照组,分析其临床病理特点,收集患者尿液提取外泌体进行形态、粒径及标志物的鉴定,免疫印迹法检测尿外泌体中A1AR及SGLT2蛋白;免疫荧光染色确定A1AR在DN患者肾脏的表达部位,免疫组化及半定量分析评估DN患者和动物A1AR与对照组的表达差异。2.分别在C57/BL野生型及管球反馈缺失的A1AR-/-小鼠中,通过腹腔注射链脲佐菌素120mg/kg建立1型DM动物模型,选择不同时间点,血糖试纸检测血糖、代谢笼留取24h尿标本、尾夹法监测血压;观察体重、血糖及尿量的变化,检测尿白蛋白水平;常规病理染色及透射电镜观察野生型及A1AR缺失DM小鼠肾脏小球、小管、血管及间质损伤,评估DN模型的建立。3.将野生型对照组、野生型糖尿病肾病组,A1AR-/-对照组与A1AR-/-糖尿病肾病组四组肾皮质组织,提取RNA进行mRNA基因芯片谱测序,筛选差异基因进行KEGG通路聚类分析,寻找A1AR参与DN损伤的可能分子通路。第二部分 A1AR在糖尿病肾病小管周微环境稳态中的保护作用1.透射电镜观察DN小鼠肾间质血管与周细胞的位置关系,免疫荧光染色观察DN患者血管内皮细胞（CD34）、周细胞（PDGFRβ）及A1AR表达的位置关系;免疫组化染色评估肾小管管周毛细血管与周细胞损伤;免疫印迹法评估周龄野生型和A1AR-/-DN小鼠肾皮质A1AR及A2AR的蛋白表达差异。观察A1AR缺失对PTC及细胞紧密连接蛋白表达的影响,免疫组化染色半定量分析周细胞PDGFRβ、淋巴管podoplanin与炎症巨噬细胞（F4/80）的关系。2.光镜和电镜观察DN患者和小鼠病理特点,利用免疫荧光染色对DN患者中A1AR与Megalin位置关系进行定位,观察DN患者和动物近端小管Megalin与cubilin损伤与蛋白尿的关系;评估A1AR缺失对该病变的影响;3.常规病理染色评估DN小鼠肾脏纤维化及细胞外基质沉积,利用免疫荧光双观察DN患者肾脏A1AR与胶原蛋白I的位置关系;免疫印迹法检测A1AR缺失对Caspase1/IL18焦亡及NLRP3/IL1β炎症小体信号通路蛋白的表达水平的影响,肾小管间质促纤维化因子TGFβ及胶原蛋白（I/III/IV）的表达量变化,评估A1AR缺失DN小管间质炎症反应及纤维化的作用。第三部分 A1AR对高糖环境中近端小管上皮细胞损伤的保护机制1.DMEM/F12培养基体外培养人近端小管上皮细胞系,至细胞80-90%融合时,倒置显微镜观察其形态学特征,免疫荧光常规行细胞鉴定（CK18,Megalin）;2.高糖、等渗甘露醇和低糖分别与细胞共培养24h,免疫荧光检测NLRP3,Caspase1/ICollagen1表达水平,评估高糖环境对近端小管上皮细胞的损伤作用。L18表达,评估近端小管上皮细胞炎症反应。72h收集细胞裂解液提取蛋白,western blot检测小管上皮细胞标志物Megalin、紧密连接蛋白Occludin、巨噬细胞分泌的炎症因子蛋白NLRP3/IL18、促纤维化因子TGFβ及胶原蛋白3.加入不同浓度的A1AR激动剂（CCPA）或A1AR抑制剂（DPCPX）与细胞共孵育,CCK-8及LDH释放试验方法分别检测二者细胞增殖与毒性,选择合适的浓度与高糖培养的细胞共孵育,Western blot检测CCPA与DPCPX对近端小管上皮细胞紧密连接蛋白（Occludin）、炎症因子（NLRP3/Caspase1/IL18）及胶原蛋白Collagen1水平的变化。第四部分 A1AR在DN水盐代谢异常相关高血压中的调节作用1.观察记录DN患者及小鼠中血压变化情况,免疫荧光染色确定DN患者中调节水盐平衡转运子及调节激酶SGK1的表达部位（SGK1NCCNKCC2SGLT2）,免疫组化染色及半定量分析评估DN患者及小鼠肾脏各水钠转运子在DN中的表达情况;2.DN小鼠动物模型中观察A1AR-/-对血压的影响,免疫组化染色及免疫印迹法评估 A1AR 缺失对水盐转运子调节酶 SGK1及各转运子（NCCNKCC2SGLT2rENac）表达的影响。统计方法采用SPSS 14.0软件进行统计分析（SPSS,Chicago,IL）,符合正态分布的计量资料以均值±标准差表示。两组间比较采用t检验,自身前后比较采用配对t检验;三组或以上比较使用单因素或多因素变量分析,采用双侧检验的方法,P<0.05为有统计学意义。研究结果第一部分 DN模型的确立及A1AR参与DN的分子通路初筛1.本研究纳入13例DN患者,平均24h尿蛋白定量5.7±3.8g,平均血肌酐129.6±61.2umol/L,DN典型肾脏病理表现为肾小球及小管基底膜弥漫性增厚,K-W结节形成,血管壁增厚伴玻璃样变,小管间质局灶性炎细胞浸润及纤维化。成功提取尿液外泌体,电镜下呈典型双膜结构、平均直径100nm（质谱法）,western blot法出检测到外泌体标志性蛋白TSG101,及小管标志物SGLT2、A1AR及NCC,提示尿液外泌体可以检测到肾小管上转运子损伤。免疫荧光观察到A1AR染色主要表达于近端小管上皮细胞。与GML组相比,DN患者肾小管A1AR表达增加约1.38倍。2.链脲佐菌素注射3天后检测到野生型及A1AR-/-小鼠实验组血糖显着升高,大于16.7mmol/L,持续16周,伴有多饮多食多尿,达到DM诊断标准。肾脏重量显着增加伴体重下降,24h尿白蛋白排泄率增加（129.4±12.2比16.7±2.5 μg/d,P<0.001）,光镜及透射电镜可观察到肾小球与小管肥大、基底膜的显着增厚,血管壁增厚与小管间质纤维化,符合DN的特点。且A1AR-/-DN组较野生型WT-DN 组蛋白尿更多（183.8±9.7 比 129.4±12.2μg/d,P<0.001）;3.WT-Control,WT-DN,A1AR-/--Control 与 KO-DN 四组小鼠肾皮质组织 mRNA基因芯片谱测序及差异基因KEGG通路富集分析结果提示:A1AR参与DN损伤主要分子机制涉及“细胞因子通路、蛋白内吞通路与细胞外基质沉积”;第二部分 A1AR在糖尿病肾病小管周微环境稳态中的保护作用1.免疫荧光共染提示周细胞标志物PDGFRβ表达在微血管内皮细胞（CD34阳性）外侧,在DN患者及小鼠动物模型中观察到周细胞与血管内皮细胞的分离,PDGFRβ表达增加（24.5±0.6%比13.2±0.5%）,伴有细胞紧密连接蛋白Occludin及CD34表达下降（20.4±0.3%比27.6±0.2%）。肾小管间质可见炎症巨噬细胞浸润,提示糖尿病小管周微环境稳态破坏;2.A1AR在近端小管、血管内皮细胞及间质炎症细胞上均有表达,DN小鼠肾脏A1AR表达为对照组的1.38倍（P<0.05）。A1AR-/-DN小鼠肾脏CD34缺失和紧密连接损害较 WT-DN 更重（CD34:0.3±0.03 比 0.6±0.08 比 1.0±0.05,P<0.001;Occludin:0.4±0.06 比 0.7±0.04 比 1.0±0.03,P=009）;3.免疫荧光结果提示近端小管上皮细胞上A1AR与megalin共表达,透射电镜观察到随着周龄的增加,DN小鼠近端小管刷状缘侧微绒毛结构缺失。在DN患者和小鼠中观察到megalin-cubilin损伤,与蛋白尿呈负性相关（DN患者r=-0.862,P=0002;DN小鼠r=-0.927,P<0.001）,损伤程度随周龄增加而进一步加重。同样A1AR缺失进一步加重DN小鼠megalin-cubilin损伤及蛋白尿;4.光镜和电镜下可观察发现WT-DN小鼠肾小管间质大量细胞外基质沉积和微丝状结构,免疫组化TGFβ1与Collagen（I,III,IV）染色证实其胶原成分。western-blot检测到焦亡相关Caspase1/IL18表达量增加;A1AR-/--DN小鼠中Caspase1/IL18 蛋白表达量进一步增加（1.52±0.6 比 1.24±0.3 比 1.0±0.2,P=0.017;1.51±0.3 比 1.3±0.2 比 1.0±0.2,P=0.018）,小管间质纤维化也进一步加重。第三部分 A1AR对高糖环境中近端小管上皮细胞损伤的保护机制1.倒置显微镜下单个近端小管上皮为多边形或椭圆形,融合后呈鹅卵石样铺路石状,免疫荧光染色可检测到细胞CK18及megalin均呈阳性,提示所培养细胞为肾脏近端小管上皮细胞;2.高糖共培养24h后,免疫荧光染色可观察到巨噬细胞标志物CD68和NLRP3/Caspase1/IL18表达。高糖共培养72h,免疫印迹检测提示高糖组A1AR表达为对照组的1.8倍,相同渗透压的甘露醇并不增加A1AR表达。同时刷状缘Megalin（0.46±0.03 比 1.1±0.05,P=0.008）与紧密连接蛋白 Occludin（0.6±0.02 比 1.0±0.03,P=0.023）表达明显降低,而NLRP3/IL18分别为对照组的4倍与2.5倍,伴有TGFβ表达量增加2倍;3.根据细胞增殖、毒性试验结果,选择0.1ummol/L的CCPA（A1AR激动剂）与0.1umol/L的DPCPX（A1AR抑制剂）分别与小管上皮细胞共孵育24h,western blot法证实CCPA可明显抑制高糖环境诱导的炎症因子NLRP3（0.4±0.03比1.0±0.06,P=0.032）;Caspase-1（0.6±0.02 比 1.0±0.01,P=0.007）,IL 18（0.7 ± 0.05 vs 1.0±0.04,P=0.045）水平,上调胶原蛋白 Collagenl（0.6±0.02 比 1.0±0.02,P=0.024）的表达。与此相反,A1AR抑制剂DPCPX可进一步加重上述损伤。第四部分A1AR在DN水盐代谢异常相关高血压中的调节作用1.本研究纳入的DN患者及DN小鼠均伴有高血压的发生,免疫荧光显示DN患者中肾脏NCC、NKCC2、SGLT2与rENac均表达于肾小管刷状缘侧,免疫组化染色及半定量分析结果显示与GML组相比,DN组NKCC2（1.6±0.3比1.0±0.2,P<0.001）与 SGLT2（1.3±0.3 比 1.0±0.2,P=0.042）表达显着增加,伴有调节激酶SGK1表达增加（1.32±0.2比1.0±0.3,P=0.041）,而NCC表达无明显差异;2.A1AR-/--DN 小鼠血压更重（127±9.4 比 118±6.0 比 106±8.5 mmmHg,P<0.001）,免疫组化染色及western blot结果显示A1AR缺失加重NCC（38 ±4.5比20±2.0 比 10±0.6%,P<0.001）、NKCC2（36±5.2 比 20±2.3 比 16±0.8%,P<0.001）与 rENac（1.32±0.1 比 0.8±0.3 比 1.0±0.1,P=0.02）表达上调,而A1AR缺失后水盐转运子调节酶SGK1表达量无明显变化。结论本研究条件下1.A1AR在糖尿病肾小管、小管周毛细血管-周细胞及间质组成的肾小管周微环境稳态损伤中具有保护作用;2.A1AR缺失导致局部巨噬细胞浸润相关的炎症反应（Caspase1/IL18）,加重肾小管megalin损伤相关蛋白尿,以及周细胞与血管内皮细胞分离诱导的小管间质纤维化;3.A1AR激动剂有助于改善该微环境稳态和炎症反应,减轻上述病理生理过程,与之相反A1AR抑制剂会进一步加重此损伤;4.DN及小鼠血压升高与肾脏水盐转运子表达异常相关,A1AR缺失小鼠血压更高,A1AR主要通过调节管球反馈参与水钠平衡及血压的调节,与SGK1无关。
赵明辉,王素霞,曾彩虹,潘晓霞,邢国兰,刘少军,刘刚,黄朝兴[6]（2018）在《肾活检病理规范化诊断的专家共识》文中研究说明肾活检病理检查可明确肾脏疾病的病理改变和病理类型,对于肾脏疾病的诊断、治疗方案制定、预后判断等具有重要意义;同时,对于揭示肾脏疾病的发病机制、发现新的肾脏疾病也可提供重要信息和诊断依据。此外,通过对肾脏病理资料的系统分析、重复肾活检病理的比较以及作为临床试验的疗效评估指标等,肾活检病理检查也是临床科研的重要组成部分。因此,规范化开展肾
黄斌,杨俊飞,季倩[7]（2018）在《肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对比分析》文中研究指明目的对比分析肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色差异。方法选取医院就诊的肾小球疾病患者68例为研究对象,并将肾活检标本分为对照组（石蜡切片）和观察组（冰冻切片）,每组68份。对比分析2组切片免疫荧光染色结果。结果 2组有效肾小球数目均≥3个,满足免疫荧光染色的相关评估要求,2组比较差异无统计学意义（P>0.05）。对照组出现较多的非特异性染色或者假阴性结果,与观察组相比,抗体Ig G、Ig A、C1q、C3荧光强度不同,差异有统计学意义（P<0.05）。结论肾活检标本石蜡切片在通过高压加热抗原修复后,实施免疫荧光染色会对肾活检标本的病理诊断造成影响。
罗教秀,储兵,曹晓珊,陈应智,吴师珍[8]（2017）在《免疫荧光和几种特殊染色在肾活检病理诊断中的应用》文中指出目的:分析免疫荧光染色及其他几种特殊染色法在肾活检病理诊断中的应用效果。方法:临床纳入58例我院2014年9月至2016年9月期间收治的慢性肾脏疾病患者作为研究对象,所有患者均进行肾穿刺活检,穿刺取得组织采用石蜡制片,分别采用免疫荧光法、六胺银染色法、甲醇刚果红染色法、黏蛋白染色法（PAS）以及Masson三色染色,对比不同方法染色的结果。结果:不同类型肾病患者中,免疫荧光染色中狼疮性肾病中IgA、IgM、IgG、C3以及Clq诊断阳性率明显高于IgA肾病和膜性肾病患者,P<0.05。在不同染色方法的对比中发现,免疫荧光染色法在肾病检测IgA、IgM、IgG、C3以及Clq诊断阳性率明显低于其他染色方法的诊断率,P<0.05。其他染色方法诊断率均无差异,P>0.05。结论:免疫荧光染色相对于其他染色方式对肾活检病理诊断率稍低,临床上推荐采用其他特殊染色方法对肾组织进行病理诊断。
金晶晶,肖立,顾晏,殷于磊[9]（2017）在《肾活检免疫组织化学法与免疫荧光直接法染色结果比较》文中研究指明目的 :探讨石蜡切片免疫组织化学（免疫组化）检测肾穿刺异常免疫复合物的可行性。方法 :收集36例肾小球肾炎的穿刺活检标本,分别行冷冻切片免疫荧光、石蜡切片免疫组化检查,并以荧光免疫检测结果作为对照,观察免疫组化染色结果。结果:7例狼疮性肾炎、16例IgA肾病、13例膜性肾小球肾炎的免疫组化IgA、IgG、IgM、C1q、C3c、C4c结果与免疫荧光冷冻切片组染色结果相同,表达强度相同,表达部位一致（P>0.05）。结论 :经适当抗原修复,石蜡切片免疫组化检查可以作为免疫荧光冷冻切片结果不理想的补救方法。
邹万忠[10]（2015）在《我国肾活检病理学回顾与展望》文中进行了进一步梳理肾脏病理学是病理学科的分支,主要分为两大领域,一为外科范畴的肾脏病理学,包括肾脏肿瘤以及其他需要外科手术的肾脏疾病;另一为内科范畴的各种肾炎和肾病。20年前魏民等[1]、10年前邹万忠[2]均对国内肾脏病理学做了总结和展望。本文再次对近10年来,我国发展较快的内科范畴的肾活检病理学做一总结和展望。
二、微波石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、微波石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用（论文提纲范文）
（1）小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术的应用研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 基本方法 |
| 1.2.2 所用仪器设备 |
| 1.2.3 制片方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 冰冻切片的结果分析 |
| 2.2 石蜡切片的结果分析 |
| 3 讨论 |
（2）常用的免疫病理方法在轻链型肾淀粉样变性分型中的作用（论文提纲范文）
| 材料和方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 方法 |
| 2.1 冰冻切片免疫荧光染色(F- IF) |
| 2.2 石蜡切片免疫荧光染色(P- IF) |
| 2.3 石蜡切片免疫组织化学染色(IHC) |
| 2.4 刚果红染色 |
| 2.5 电镜检查 |
| 3 结果判断标准 |
| 3.1 IF结果 |
| 3.2 免疫组化结果 |
| 结 果 |
| 1 冰冻组织保存良好组的轻链染色结果 |
| 2 冰冻组织保存不佳组的轻链染色结果 |
| 讨 论 |
（4）石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 标本制备 |
| 1.5 染色方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（5）腺苷1型受体在糖尿病肾病小管间质损伤中不依赖于管球反馈的机制初探（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 A1AR参与糖尿病肾病发病的分子通路初筛 |
| 第一节 糖尿病肾病患者临床病理特点及A1AR表达情况 |
| 第二节 A1AR缺失糖尿病肾病小鼠动物模型的建立 |
| 第三节 糖尿病肾病小鼠mRNA表达谱芯片检测及数据分析 |
| 小结 |
| 第二部分 A1AR保护糖尿病肾小管周微环境稳态及机制初探 |
| 第一节 A1AR缺失加重糖尿病肾小管周微环境稳态的破坏 |
| 第二节 A1AR缺失加重近端小管megalin损伤相关蛋白尿 |
| 第三节 A1AR缺失加重糖尿病肾病炎症反应及小管间质纤维化 |
| 小结 |
| 第三部分 A1AR保护高糖环境中近端小管上皮细胞损伤的机制 |
| 第一节 近端小管上皮细胞的培养与鉴定 |
| 第二节 高糖损伤近端小管上皮细胞 |
| 第三节 A1AR对高糖环境下近端小管上皮细胞的保护机制 |
| 小结 |
| 第四部分 A1AR缺失加重糖尿病肾病高血压的管球反馈机制(附录) |
| 第一节 DN患者水盐转运子异常表达与高血压的关系 |
| 第二节 A1AR缺失加重肾脏水盐转运子表达异常 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述1 Megalin损伤与糖尿病肾病蛋白尿形成的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 腺苷及其受体在肾小管间质损伤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（7）肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对比分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 石蜡切片免疫荧光染色技术: |
| 1.2.2 冰冻切片免疫荧光染色技术: |
| 1.3 半定量分析免疫荧光染色结果 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 肾小球数目比较 |
| 2.2 免疫荧光染色比较 |
| 3 讨论 |
（8）免疫荧光和几种特殊染色在肾活检病理诊断中的应用（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料: |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 准备工作: |
| 1.2.2 免疫荧光染色法: |
| 1.2.3 六胺银染色法: |
| 1.2.4 甲醇刚果红染色法: |
| 1.2.5 黏蛋白染色法 (PAS) : |
| 1.2.6 Masson三色染色法: |
| 1.3 观察指标: |
| 1.4 统计学处理: |
| 2 结果 |
| 2.1 染色结果: |
| 2.2 镜下染色情况 |
| 3 讨论 |
（9）肾活检免疫组织化学法与免疫荧光直接法染色结果比较（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 1. 标本: |
| 2. 仪器: |
| 3. 主要试剂免疫荧光试剂: |
| 二、方法 |
| 1. 标本分配: |
| 2. 免疫荧光直接法染色: |
| 3. 石蜡切片免疫组化法: |
| 4. 常规HE染色: |
| 三、结果判定 |
| 1. 光镜: |
| 2. 免疫荧光: |
| 3. 免疫组化: |
| 4. 统计学分析: |
| 结果 |
| 讨论 |
四、微波石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用（论文参考文献）
- [1]小儿肾穿刺组织免疫荧光病理检查技术的应用研究[J]. 王浥霏,张闽,李晓未,李萍. 名医, 2020(17)
- [2]常用的免疫病理方法在轻链型肾淀粉样变性分型中的作用[J]. 张帆,喻小娟,王素霞,屈磊,马依依,刘刚,杨莉. 标记免疫分析与临床, 2020(05)
- [3]肾组织石蜡切片免疫荧光技术中抗原修复方法的探讨[J]. 周雅丽,李远,郭佳,邢国兰,刘章锁. 中华肾脏病杂志, 2020(03)
- [4]石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用[J]. 弓玉祥,陈平圣,杨旻宇. 临床与实验病理学杂志, 2020(01)
- [5]腺苷1型受体在糖尿病肾病小管间质损伤中不依赖于管球反馈的机制初探[D]. 田东丽. 北京协和医学院, 2019(02)
- [6]肾活检病理规范化诊断的专家共识[J]. 赵明辉,王素霞,曾彩虹,潘晓霞,邢国兰,刘少军,刘刚,黄朝兴. 中华肾脏病杂志, 2018(12)
- [7]肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对比分析[J]. 黄斌,杨俊飞,季倩. 临床合理用药杂志, 2018(32)
- [8]免疫荧光和几种特殊染色在肾活检病理诊断中的应用[J]. 罗教秀,储兵,曹晓珊,陈应智,吴师珍. 河北医学, 2017(06)
- [9]肾活检免疫组织化学法与免疫荧光直接法染色结果比较[J]. 金晶晶,肖立,顾晏,殷于磊. 诊断学理论与实践, 2017(01)
- [10]我国肾活检病理学回顾与展望[J]. 邹万忠. 中华病理学杂志, 2015(07)